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科 技 动 态


西农大对我国野生葡萄抗病基因克隆研究达到国际领先水平


2006-12-31
  本报讯 (支勇平)由西北农林科技大学博士生导师王跃进教授
主持完成的国家转基因植物研究与产业化开发专项“中国葡萄属植物
野生种抗白粉病基因克隆”研究项目,经过6年的探索研究,2006年12
月30日在陕西杨凌通过了国家教育部组织的科技成果鉴定。与会专家
一致认为:该课题针对世界葡萄生产中存在的问题,综合采用现代分
子生物学技术,以我国特有的高抗白粉病的中国葡萄属野生种华东葡
萄白河-35-1为材料,在抗白粉病基因克隆与功能分析、cDNA文库构
建和相关EST克隆以及转基因植株培育等方面具有明显的创新性,研究
成果居国际领先水平。
  我国是世界葡萄属植物最重要的原产地之一,拥有丰富多样的野
生葡萄资源,这些资源不仅丰产性好,与欧洲葡萄杂交易亲和,对主
要真菌病害具有极强的抗性,是重要的抗病基因资源。为了利用我国
野生葡萄的抗病基因并通过转基因技术培育抗病优质葡萄新品种,王
跃进教授率领的科研项目组首次采用mRNA差异显示技术,从高抗葡萄
白粉病的中国葡萄属野生种华东葡萄白河-35-1中获得了抗白粉病
相关基因cD-NA片段20个;采用抗病基因同源序列的方法获得了抗病
相关基因cDNA片段7个。首次从中国葡萄属野生种华东葡萄白河-35
-1中克隆了抗白粉病芪合成酶基因家族成员6个、乙二醛氧化酶基因
1个、抗坏血酸过氧化物酶基因1个、醛脱氢酶基因家族成员3个、病
程相关蛋白基因1个、几丁质酶基因家族成员2个,共计14个基因。科
研人员对这些基因进行了体外表达研究,分离纯化了基因的表达产物,
制备了多克隆抗体。构建了抗白粉病相关基因表达载体,采用农杆菌
介导的方法,对欧洲葡萄无核白、底来特和爱莫无核的叶片,以及爱
莫无核胚珠诱导的胚性愈伤组织和胚状体进行了遗传转化,获得转基
因葡萄植株56株。构建了中国葡萄属野生种华东葡萄白河-35-1抗
白粉病基因cDNA文库,获得了抗白粉病基因相关ESTs序列145个,其
中抗白粉病相关基因cDNA全长序列17个,并首次发现抗白粉病相关新
基因5个;首次获得中国葡萄属野生种抗病候选基因cDNA片段47个。
  据了解,西北农林科技大学此次所获得的中国葡萄属野生种抗白
粉病相关基因和中国葡萄属野生种抗病候选基因DNA片段47个、抗白
粉病基因相关ESTs序列145个,不仅具有重要的理论价值,而且对于
我国乃至世界葡萄的发展具有重要的实践意义。同时,对获得具有我
国自主知识产权的新品种具有很重要的意义。

   
 

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